發色底物系列知識分析

發色底物系列

首先人工合成可以被待測凝血活酶催化裂解的化合物，且化合物連接上產色物質，在檢測過程中產色物質可被解離下來，使被檢樣品中出現顏色變化，根據顏色變化可推算出被檢凝血活酶的活性。產色物質一般選用連接對硝基苯胺（PNA)。游離的PNA呈黃色，其測定波長選用405nm。在這一波長下，其它物質對光的吸收小于PNA對光吸收的1%。具體檢測方法即可采用動態法、也可采用終點法。動態法即是連續記錄樣品的吸光度變化，算出單位時間吸光度的變化量，并以每分鐘吸光度的變化來報告結果。終點法即是指在活性酶同產色物質作用一段時間后，加入乙酸終止反應，檢測此段時間內吸光度的變化，進而推算出待檢酶的活性。凝血儀上多數采用動態法，因為它比終點法簡單、結果更為準確。其優點主要表現在:

用酶學方法直接定量、測定結果準確、重復性好、便于自動化和標準化、所需樣品量小。

發色底物S-2222 TM Xa因子的發色底物

Bz-IIe-Glu（γ-OR)-Gly-Arg-pNA•HCl

R = H（50％）和R = CH 3（50％）

分子量：741.3

S-2238 TM 凝血酶的發色底物

H-D-Phe-Pip-Arg-pNA•2HCl

分子量：625.6

S-2251 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發色底物

H-D-Val-Leu-Lys-pNA•2HCl

分子量：551.6

S-2288 TM t-PA和其他廣泛絲氨酸蛋白酶的顯色底物

H-D-Ile-Pro-Arg-pNA•2HCl

分子量：577.6

S-2302 TM 血漿激肽釋放酶和因子XIIa的發色底物

H-D-Pro-Phe-Arg-pNA•2HCl

分子量：611.6

S-2366 活化蛋白C和因子XIa的發色底物

pyroGlu-Pro-Arg-pNA•HCl

分子量：539.0

S-2403 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發色底物

pyroGlu-Phe-Lys-pNA•HCl

分子量：561.0

S-2765 Xa因子的發色底物

Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA•2HCl

分子量：714.6